单细胞悬液制备仪助力小鼠皮肤组织单细胞悬液的制备

发布日期:2024-11-27 本文关键词:单细胞悬液制备仪,单细胞制备仪,单细胞悬液仪

  实验研究方向:此次实验以小鼠皮肤为样本;由于小鼠皮肤组织内含有较多的免疫细胞,为了更好的对免疫与炎症的基础研究、肿瘤免疫治疗转化应用研究、医学科学发展战略研究,此次实验我们选用上海净信科研者的单细胞悬液制备仪,利用消化后得到单细胞悬液,用于后期做流式细胞分析。


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  小鼠皮肤单细胞悬液制备的实验步骤:

  

  1.组织获取:取小鼠一只,麻醉致死,取皮肤150mg组织,置于无菌装有4℃完全培养液的培养皿中,将培养皿置入冰盒子快速拿回实验室。将上述组织用含有双抗的培养液浸泡漂洗20分钟,并用无血清培养液反复冲洗干净。用眼科剪去除组织块中的脂肪、神经组织、结缔组织和坏死组织)

  

  2、酶消化/机械分离:用剪刀将取样切割成3mm³左右的小块,加入10倍体积组织量(2ml)并预热到37℃的组织消化酶,放入37℃单细胞悬液仪,消化30min左右 (内置程序选择),消化完成后,用移液器吹打,加入4ml消化终止液后,70um细胞滤网过滤得细胞悬液

  

  3、洗涤和重悬(去红去酶):用Ficoll去除红细胞。分离后的细胞悬液需要离心纯化,250-300 g离心10分钟1次纯化

  

  小鼠皮肤单细胞悬液制备的实验结果:


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  实验解决的问题:从组织获得存活单细胞是一个复杂过程,目前市面上组织单细胞化的方法有采用机器处理或者人工处理方法,以上处理方法均存在处理时间长、细胞处于逆境状态时间长、 细胞得率低、细胞存活率低、操作繁琐等问题。

  

  温控型单细胞悬液制备仪JX-CKSM-12WK是一种集成金属浴消化与温和剪切组织的新一代细胞悬液制备设备,对样品的消化处理过程始终处在恒温状态,通过恒温消化,组织剪切,得到高活率的单细胞悬液。单细胞制备仪具有起始组织量小、时间短、细胞得率高、细胞活性高的性能特点。