实验目的:此次实验对象是小鼠肺组织样品,经过单细胞悬液制备仪的实验制备后可用流式细胞检测样品活细胞的得率。细胞样品的制备在流式细胞检测过程中十分重要,单细胞悬液制备仪的应用可获取高活性、完整性好的单细胞悬液,可大幅度提高样品实验效率和成功率。
实验设备:单细胞悬液制备仪JX-CKSM-WK系列
小鼠肺组织样品前处理的实验操作过程:
1.手动将运行模块(样品槽)移至加热模块一侧,打开电源开关,点击热板模块加热和运行模块加热,静待5分钟左右使模块温度上升至所需温度,一般为37.5°C。
2.将要研磨的小鼠肺组织样品剪成1mm以下的小块放入专用配套样品试管中,加入消化液,消化液要尽量加满,避免试管中有气泡。
3.将要研磨的小鼠肺组织样品剪成1mm以下的小块放入专用配套样品试管中,加入消化液,消化液要尽量加满,避免试管中有气泡。
4.将试管从预热模块中取出放入运行模块中
5.合上仪器盖,选定程序,点击启动,运行半小时左右,程序停止后一会儿开盖观察试管中样品的消化情况,若还有大块组织存在,可以自定义程序选择8000rpm,1min启动。
6.待消化液运行完后取出样品,上下振荡样品管十下,观察浑浊度和颜色,过细胞筛网后加入终止液即是单细胞悬液。
实验注意事项:
1.消化酶和终止液均需要在冷冻环境下保存。
2.消化酶解冻时需要在常温条件下解冻,不可以放入水浴或者其它加热仪器中解冻,温度升高对酶的活性会有很大的影响。
4.单次样品量不要超过研磨管内珠子的大小。
5.程序运行结束后不要立马取出样品,可以稍等一分钟后再取出。
小鼠肺组织样品的前处理实验研磨效果图:
实验结果:对样品悬液的测序,细胞活率为96.8%,满足样品的实验需求。
上海净信单细胞悬液制备仪它能快速完成组织到单细胞的过程,降低细胞逆境时间,提高细胞存活率。总的来说,净信单细胞悬液制备仪具有组织高利用率、单细胞化过程高效、细胞活性高的特点,常应用于流式细胞术/单细胞测序/原代细胞培养等实验。